martedì 24 novembre 2009

Esperimento: estrazione DNA da un comune frutto

Ingredienti:
-Detersivo (sapone comune o detersivo per piatti);
-Acqua;
-Sale;
-Frutto come banana o mela 100 g;
-Alcol etilico;
-Colorante (blu di metilene)

1)Preparare soluzione di estrazione: in un becker mettere 4g di sale, 80 ml di acqua distillata. Far sciogliere il sale. Aggiungere 10 ml di detersivo. Portare la soluzione a 100 ml aggiungendo altra acqua distillata. Il detersivo serve per sciogliere le membrane nucleari e cellulari. Il sale, invece, favorisce l'eliminazione delle proteine che avvolgono il DNA.




2)Schiacciare la polpa fino a renderla omogenea e amalgamare alla soluzione di estrazione (vedi punto 1). Lasciare per 15 minuti in un pentolino, alla temperatura di 60°C.


3)Prendere un colino e filtrare il miscuglio ottenuto; versare il filtrato in una provetta (5 - 6 ml circa).

4) Stratificare sul filtrato un uguale volume di alcool etilico; attendere circa 5 minuti per permettere al DNA di precipitare nell'alcool. Il DNA è solubile in acqua, ma insolubile in alcool, nel quale precipita e si rende visibile. Si osserverà così la formazione nello strato alcolico di filamenti biancastri di DNA (Effetto medusa)


5)Prelevare una "nuvoletta" di DNA e metterla su di un vetrino, coprirlo con l'apposito vetrino-coprioggetto e colorarlo con il blu di metilene per migliorarne la visione. Infine, aggiungere qualche goccia di acqua distillata.
A QUESTO PUNTO IL DNA E' PRONTO ALL'OSSERVAZIONE AL MICROSCOPIO.
E' PREFERIBILE UTILIZZARE L'INGRANDIMENTO 40. GRAZIE PER LA LETTURA.